新型脂肪酶基因的克隆与表达

• 作者: 刘浩浩 方珊 李华林 杨剑冰 赵健 赵艳华
• 来源期刊: 食品与药品
• 学科: 生物学
• 关键词: 同源比对 黑曲霉 重组脂肪酶 表达 活性
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 15-18
• 页数: 4页
• 分类号: Q785
• 字数: 2495字
• 语种: 中文

摘要

目的 通过同源比对筛选黑曲霉中新型活性脂肪酶.方法 抽提黑曲霉基因组,依据从烟曲霉中获得的高活性脂肪酶基因序列,NCBI网站序列比对后搜索到与烟曲霉af1-1同源性较高的黑曲霉脂肪酶基因序列an1-1,设计引物进行PCR扩增,产物胶回收后连接至PMD 18T载体,测序验证正确后将目的序列连接至表达载体PET28a,转化Escherichia coli BL21 (DE3)中表达和测定活性.结果 克隆了一种来源于黑曲霉新型脂肪酶基因an1-1,15℃表达条件下主要为可溶性表达,对C4底物(对硝基苯酚丁酸酯)活性达2365 U/L.结论 同源序列比对能有效提高筛选效率,并从黑曲霉中筛选到一种新的脂肪酶基因,在大肠杆菌中可高表达并具有生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵健	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	58	146	4.0	9.0
2	方珊	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	1	4	1.0	1.0
3	刘浩浩	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	1	4	1.0	1.0
4	李华林	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	1	4	1.0	1.0
5	赵艳华	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	1	4	1.0	1.0
6	杨剑冰	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	1	4	1.0	1.0