产中性蛋白酶工程菌的构建及其发酵条件的初步优化

• 作者: 卜令军 李玉 董逸楠 路福平 靳文斌
• 来源期刊: 天津科技大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 中性蛋白酶 枯草芽孢杆菌 工程菌 发酵条件
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 【食品与生物技术】
• 页码范围: 9-13
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 2899字
• 语种: 中文

摘要

为构建1株产中性蛋白酶的工程菌株并对其发酵条件进行优化，以中性蛋白酶工业生产菌株枯草芽孢杆菌AS1.398的基因组为模板，采用PCR技术扩增获得中性蛋白酶基因npr，与高拷贝质粒pWB980连接并转入蛋白酶缺陷型菌株枯草芽孢杆菌WB600中得到重组工程菌WB600/pWB980-npr．在初筛平板上工程菌蛋白酶活力明显高于工业生产菌 AS1.398，工程菌发酵活力可达1,398.3,U/mL ．通过对其发酵工艺进一步优化，在接种量5%、装液量100,mL/500,mL、摇床转速180,r/min、温度34,℃的条件下发酵48,h，发酵液的酶活力可达2,487.5,U/mL，比优化前提高了78%．