苏云金杆菌Cry2Ab可溶蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 关雄 林莉 邵恩斯
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 苏云金杆菌 Cry2Ab 可溶蛋白 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 106-111
• 页数: 6页
• 字数: 3902字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2013.01.013

摘要

苏云金杆菌Cry2Ab蛋白是一类对鳞翅目昆虫有特异性毒性作用的毒素蛋白,已广泛应用于针对鳞翅目害虫的防治之中.依据苏云金杆菌cry2Ab基因序列设计一对全长引物,从苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis WB9菌株总DNA中克隆出cry2Ab基因全序列,构建Cry2Ab-PK表达载体,将获得的Cry2Ab-PK阳性克隆进行原核诱导表达,获得约90 kD的Cry2Ab-GST融合蛋白,经批量纯化并切除GST标签后获得可溶Cry2Ab蛋白,约65 kD.利用纯化Cry2Ab可溶蛋白免疫新西兰雄性大白兔(Oryctolagusc uniculus),制备Cry2Ab兔源多克隆抗血清,通过间接ELISA法测定Cry2Ab抗血清效价超过1∶150 000.Westem blot测定结果表明,制备的Cry2Ab兔源抗血清能特异性识别Cry2Aa及Cry2Ab抗原蛋白,不能识别Cry1Ab及Cry3Aa抗原蛋白.研究结果对深入研究Cry2A毒素蛋白作用机理及毒素与受体间互作关系提供了技术支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	关雄	福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室	112	2066	21.0	43.0
2	邵恩斯	福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室	6	7	2.0	2.0
3	林莉	福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室	5	105	3.0	5.0