T7噬菌体衣壳蛋白10A的表达、纯化及多克隆抗体的制备

• 作者: 宁保安 彭媛 白家磊 范献军 陈卉爽 高志贤
• 来源期刊: 解放军预防医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: T7噬菌体 衣壳蛋白10A 包涵体 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论著
• 页码范围: 484-486
• 页数: 3页
• 分类号: Q939.48
• 字数: 2193字
• 语种: 中文

摘要

目的 表达纯化T7噬菌体衣壳蛋白10A,并免疫家兔得到抗10A多克隆抗体,为研究噬菌体展示抗体技术,进而筛选致病微生物蛋白抗体奠定基础.方法 37℃培养含有T7噬菌体10A蛋白质粒的大肠杆菌BLT5615,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷直接诱导表达该蛋白;SDS-PAGE鉴定表达状态,盐酸胍变性-尿素复性纯化以包涵体形式存在的蛋白并免疫家兔;辛酸-硫酸铵沉淀法纯化多克隆抗体,间接ELISA测定效价,Western Blot鉴定特异性生.结果 成功表达了T7噬菌体衣壳蛋白10A.SDS-PAGE显示所表达的蛋白相对分子质量约为37 kDa,主要以包涵体形式存在;复性后SDS-PAGE分析获得单一条带蛋白.利用该蛋白免疫家兔,6次免疫后抗血清的效价均达到1∶160000.纯化后的多克隆抗体可以和T7噬菌体衣壳蛋白10A特异结合.结论 成功表达、纯化了T7噬菌体衣壳蛋白10A,并制备了其多克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宁保安	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	34	101	5.0	8.0
2	高志贤	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	135	1451	21.0	32.0
3	陈卉爽	华中农业大学食品科技学院	1	1	1.0	1.0
4	范献军	华中农业大学食品科技学院	1	1	1.0	1.0
5	白家磊	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	6	19	3.0	4.0
6	彭媛	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	11	17	2.0	3.0