HIV-1 Vpu蛋白的原核表达、鉴定和纯化

• 作者: 刘永健 孙长荣 李天一 李敬云 李林 贾磊 隋洪帅 韩婧婉
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 人免疫缺陷病毒Ⅰ型 Vpu蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 474-477
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3123字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2013.04.006

摘要

目的：克隆、表达、纯化人免疫缺陷病毒Ⅰ型（HIV-1）Vpu蛋白，为其功能及免疫学研究奠定基础。方法：PCR扩增Vpu基因，纯化、酶切后克隆到原核表达载体pET32a中，转化大肠杆菌BL21（DE3）菌株获得表达工程菌株， IPTG诱导蛋白表达，免疫印迹鉴定目的蛋白，亲和层析纯化蛋白。结果：构建了HIV-1 Vpu蛋白的原核表达载体Vpu-pET32a，并在大肠杆菌中高效表达，目的蛋白呈可溶性形式存在，免疫印迹检测显示为目的蛋白，经Ni-NTA Agarose纯化获得了高纯度的目的蛋白。结论：在原核表达系统中表达了可溶性HIV-1 Vpu蛋白，为进一步进行HIV-1 Vpu蛋白的免疫原性和功能研究奠定了基础。