跨膜转导肽TAT、9R和牛Sox2融合蛋白原核表达载体的构建与表达研究

• 作者: 潘传英 熊亮 甘鹏 蓝贤勇 贾文超 陈宏
• 来源期刊: 西北农林科技大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 黄牛 体细胞重编程 TAT Sox2 多聚精氨酸(9R) 原核表达
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 分类号: S823.8+12|Q813.2
• 字数: 4396字
• 语种: 中文

摘要

[目的]构建pTAT-bSox2-9R融合表达载体,并对其进行原核表达研究,为利用TAT和多聚精氨酸(9R)的跨膜作用实现转录因子蛋白直接重编程牛体细胞提供科学资料.[方法]以GenBank上公布的牛Sox2基因编码区序列为基础,设计并合成含酶切位点、跨膜转导肽TAT和9R的引物;利用PCR扩增方法获得包括Sox2、TAT和9R的重组DNA序列,并将其克隆到空质粒pTAT-HA上,从而构建pTAT-HA-bSox2-9R重组表达载体;将经酶切鉴定和测序验证后的重组表达载体转化大肠杆菌,在不同IPTG浓度和诱导时间等条件下进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析.[结果]成功获得bSox2-9R重组序列,成功构建重组质粒pTAT-bSox2-9R;pTAT-bSox2-9R在0.6 mmo/L的IPTG于37℃诱导4h的条件下表达目的蛋白约36 ku,经Western blot验证为目的蛋白.[结论]成功获得了pTAT-bSox2-9R融合蛋白,为多聚精氨酸蛋白转导域(PTD)介导的转录因子蛋白直接重编程黄牛体细胞以获得诱导多潜能干细胞的研究积累了原始资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈宏	西北农林科技大学动物科技学院	225	1718	19.0	31.0
2	蓝贤勇	西北农林科技大学动物科技学院	53	334	9.0	16.0
3	潘传英	西北农林科技大学生命科学学院	18	49	4.0	6.0
7	贾文超	西北农林科技大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
8	甘鹏	西北农林科技大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
9	熊亮	西北农林科技大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0