嗜热菌Anoxybacillus sp.DL3产蛋白酶条件及其酶学性质研究

• 作者: 冯硕 应长青 李旭颖 洪心 邢燕 齐舒雅
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 嗜热菌 蛋白酶 产酶条件 酶学性质
• 年，卷（期）: 2013,（29）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 5619-5624
• 分类号: R939.9|TQ920.1|TS201.3
• 语种: 中文

摘要

目的:对Anoxybacillus sp.DL3的产蛋白酶条件及其酶学性质进行研究,为下一步进行蛋白酶基因的克隆、表达提供依据.方法:应用常规方法液体培养细菌,研究温度、pH、培养基中碳源、氮源对菌株产蛋白酶的影响,硫酸铵盐析的方法提取酶液,并采用Folin法测酶活性.用紫外分光光度计在OD680 nm测吸光值.并对提取的蛋白酶液进行酶的最适温度、pH以及酶的热稳定性和pH稳定性研究,向酶液中添加金属离子和EDTA、PMSF,研究其对酶活性的影响.结果:在培养基初始pH是6.5,培养温度为40℃时菌株产酶酶活性最大;培养基中以乳糖为碳源,酵母膏和硫酸铵为氮源,碳源与氮源的比例为1:2时,酶活最大.酶学性质研究结果显示:该酶的最适反应温度是55℃,最适反应pH是7.0;在50℃保温20 min～80min内,酶活力下降幅度较小.60℃保温60min后,仍保持约60％的酶活.70℃保温60 min后,残余酶活为30％.该酶在pH为6.0～8.0范围内,相对酶活差别不是很大,下降趋势大致相同.在强碱条件下,相对酶活下降很明显.Fe2+、Cu2+和Hg2+对酶活性有明显的抑制作用;Ca2+、Mg2+、Mn2+等金属离子对酶活性有明显的促进作用;乙二胺四乙酸(EDTA)和苯甲基磺酰氟(PMSF)对酶活性也有一定抑制作用.结论:Anoxybacillus sp.DL3所产的蛋白酶为嗜热中性蛋白酶,此酶具有较好的热稳定性和pH耐受性,该菌株具有进一步开发、利用的价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	应长青	哈尔滨医科大学公共卫生学院	10	45	4.0	6.0
2	洪心	黑龙江省医院检验科	17	23	3.0	4.0
3	齐舒雅	哈尔滨医科大学公共卫生学院	2	6	2.0	2.0
4	李旭颖	哈尔滨医科大学公共卫生学院	4	7	2.0	2.0
5	邢燕		5	51	4.0	5.0
6	冯硕	哈尔滨医科大学公共卫生学院	1	4	1.0	1.0