慢病毒介导多短发卡 RNA 串联载体构建与体内外抗口蹄疫效果评估

• 作者: 刘庆友 崔奎青 张晓溪 李兰玉 李湘萍 石德顺 郑海学
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 多shRNA 慢病毒载体 抗病毒
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 动物科学? 兽医学
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 分类号: S813.3
• 字数: 4712字
• 语种: 中文

摘要

【目的】探讨应用多短发卡RNA（ shRNA）串联沉默口蹄疫病毒RNA复制的可行性。【方法】针对口蹄疫病毒（Foot and mouth disease， FMDV）非结构蛋白基因3B和3D保守区域设计合成3个shRNA的串联片段，并分别用3个不同序列的启动子引导，成功构建了3shRNA串联的慢病毒RNAi载体。利用慢病毒3质粒包装系统共转于293T细胞包装成慢病毒颗粒。利用包装的慢病毒处理细胞及乳鼠，并接种FMDV，观察FMDV抑制情况。【结果和结论】结果显示，慢病毒处理BHK-21获得的转基因细胞中检测shRNA表达；通过O型FMDV接种发现转基因细胞对口蹄疫病毒的复制有明显的抑制，其中在接种后24 h病毒拷贝量仅为普通细胞的1/3；O型FMDV毒株接种于抗口蹄疫慢病毒载体预处理过的3～5日龄乳鼠，在5 LD50滴度下全部乳鼠均存活，在20 LD50滴度下存活率也提高50％。构建的慢病毒介导多shRNA串联表达抗口蹄疫载体能提高BHK-21细胞和乳鼠对口蹄疫病毒的抵抗力，有效地避免了5 LD50滴度内乳鼠的死亡现象，具有抵抗口蹄疫病毒毒性的良好性能。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	石德顺	广西大学动物科学技术学院	241	1058	14.0	21.0
2	李湘萍	广西大学动物科学技术学院	42	231	7.0	14.0
3	刘庆友	广西大学动物科学技术学院	54	200	7.0	11.0
4	崔奎青	广西大学动物科学技术学院	40	151	6.0	10.0
5	郑海学	中国农业科学院兰州兽医研究所	24	22	2.0	4.0
6	李兰玉	广西大学动物科学技术学院	6	4	2.0	2.0
7	张晓溪	广西大学动物科学技术学院	7	43	2.0	6.0