结核分枝杆菌酯酶Rv1400c原核表达及表达产物的酶活性分析?

• 作者: 刘思国 李金伟 王全凯 陶荣珊
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 结核分枝杆菌酯酶Rv1400c pET28b-Rv1400c重组质粒 包涵体 酯酶活性
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 701-706
• 页数: 6页
• 分类号: S852.61
• 字数: 4445字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13327/j.jjlau.2014.2169

摘要

为探究结核分枝杆菌酯酶Rv1400c活性，以进一步研究Rv1400c的结构和功能。以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板，对 Rv1400c 基因进行扩增，并将其克隆到 pET28b （＋）原核表达载体上，构建pET28b－Rv1400c重组质粒，然后将构建的重组质粒转化到BL21（ DE3）表达菌株中，增菌后用IPTG进行诱导表达再用亲和层吸树脂法进行纯化，利用不同底物、不同pH、不同温度对纯化后的Rv1400c酯酶进行活性分析。结果表明：成功构建出pET28b－Rv1400c重组质粒；SDS－PAGE和Western blot显示，Rv1400c以包涵体形式表达，蛋白分子质量为39 ku；在对8种底物的筛选中发现Rv1400c在C2～C14中具有活性，其中以在C2中活性最好；在以C12为底物、pH 8?0、37℃条件下酯酶活性最高。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王全凯	吉林农业大学动物科学技术学院	110	700	15.0	21.0
3	陶荣珊	吉林农业大学动物科学技术学院	3	30	3.0	3.0