敲低CTCF腺病毒表达载体的构建及效果检测

• 作者: 师明磊 张彦 王天艺 赵志虎
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: CCCTC结合因子 RNA干扰 腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 484-487
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2876字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2014.04.007

摘要

目的：获得敲低效果较好的CCCTC结合因子（CTCF)的RNA干扰腺病毒载体，以便于研究其在肿瘤发生发展中的作用。方法：从已发表文献中获得CTCF敲低靶序列，合成2对含有小发卡结构的寡核苷酸序列，将其进行退火磷酸化后，分别克隆到腺病毒包装载体上；将重组质粒转染人胚肾293A细胞，收获腺病毒；将收获的腺病毒分别感染人胚肾HEK293细胞和靶细胞人肺腺癌细胞A549，通过RT-PCR和Western印迹鉴定相关基因的表达变化。结果与结论：RT-PCR和Western印迹鉴定显示构建的表达CTCF短发夹RNA（shRNA）的腺病毒载体能够有效抑制CTCF转录和蛋白水平，为后续CTCF的生物学功能和机制研究奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵志虎	军事医学科学院生物工程研究所	48	447	11.0	20.0
2	师明磊	军事医学科学院生物工程研究所	17	69	5.0	7.0
3	张彦	军事医学科学院生物工程研究所	21	110	6.0	10.0
4	王天艺	军事医学科学院生物工程研究所	1	0	0.0	0.0