FBXO6稳定表达肿瘤细胞系的构建及其亚细胞器定位

• 作者: 刘彬 崔佳毅 徐含章 苏绪波 陈国强
• 来源期刊: 中国科技论文
• 学科: 医学
• 关键词: 病理生理学 FBXO6 逆转录病毒载体 内质网 A549细胞
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 696-698,702
• 页数: 4页
• 分类号: R363.2
• 字数: 3286字
• 语种: 中文

摘要

检测 FBXO6在多种肿瘤细胞中的表达和定位情况并构建稳定表达 FBXO6的肿瘤细胞株。运用 RT-PCR 方法，在人胚肾293T 细胞以及9种不同来源的肿瘤细胞中，检测了 FBXO6的表达情况。以载体质粒 pBabe-3Flag-FBXO6-puro/pBabe-3Flag-con、包装质粒 pCMV-GAG-POL 及包膜质粒 pCMV-VSVG 用 Lipofectamine2000共转染包装细胞系293T，收集病毒颗粒感染 A549细胞，经嘌呤霉素筛选稳定表达细胞株，Western blot 鉴定 FBXO6的表达。利用激光共聚焦荧光显微镜，采用间接免疫荧光方法，检测外源性 FBXO6在 A549中的亚细胞定位。在10种不同来源的细胞株中，FBXO6在 A549细胞中的表达最高。成功筛选出嘌呤霉素抗性细胞系 A549-Con 与 A549-3Flag-FBXO6。Western blot 方法发现 A549-3Flag-FBXO6细胞系稳定表达 FBXO6蛋白。间接免疫荧光发现 FBXO6与内质网 tracker 有共定位。FBXO6在肺癌 A549细胞中高度表达，构建了稳定表达 FBXO6的 A549细胞系，部分 FBXO6分布在内质网中。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈国强	上海交通大学医学院病理生理学教研室	25	71	5.0	7.0
2	刘彬	上海交通大学医学院病理生理学教研室	4	24	3.0	4.0
3	徐含章	上海交通大学医学院病理生理学教研室	4	1	1.0	1.0
4	崔佳毅	上海交通大学医学院病理生理学教研室	3	1	1.0	1.0
5	苏绪波	上海交通大学医学院病理生理学教研室	1	1	1.0	1.0