miR-20b慢病毒表达载体的构建及表达

• 作者: 余章斌 彭宇竹 朱春 朱莎莎 朱金改 韩树萍
• 来源期刊: 江苏医药
• 学科: 医学
• 关键词: miR-20b 慢病毒 P19细胞
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 129-131,封2
• 分类号: R394
• 语种: 中文

摘要

目的 构建鼠miR-20b慢病毒表达载体,检测其在P19细胞中的过表达效果.方法 设计并合成含有miR-20b成熟序列的编码短发卡状RNA(shRNA)的双链DNA.将shRNA克隆入慢病毒载体,与Pcgvp、Rev和Vsvg包装质粒共转染HEK-293T细胞包装病毒,收取病毒上清液,纯化后感染P19细胞.荧光倒置显微镜下观察感染效率,实时定量PCR检测慢病毒感染后miR-20b的相对表达量.结果 经双酶切分析及测序验证,成功构建了miR-20b的过表达载体.慢病毒感染P19细胞的效率可达到70％以上,miR-20b表达水平明显升高.结论 成功构建了鼠miR-20b的慢病毒表达载体,包被的病毒可以在P19细胞中实现过表达效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭宇竹		16	86	6.0	8.0
2	余章斌	南京医科大学附属南京市妇幼保健院儿科	88	841	16.0	24.0
3	韩树萍	南京医科大学附属南京市妇幼保健院儿科	86	893	17.0	24.0
4	朱金改	南京医科大学附属南京市妇幼保健院儿科	9	22	4.0	4.0
5	朱莎莎		2	0	0.0	0.0
6	朱春	南京医科大学附属南京市妇幼保健院儿科	15	86	5.0	9.0