黑曲霉胞外β-葡萄糖苷酶的纯化及酶学性质的研究

• 作者: 别松涛 徐星 肖华 黄琳琳
• 来源期刊: 天津科技大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: β-葡萄糖苷酶 分离纯化 黑曲霉
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 【食品与生物技术】
• 页码范围: 15-19
• 页数: 5页
• 分类号: Q814.1
• 字数: 3367字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13364/j.issn.1672-6510.20140081

摘要

利用硫酸铵盐析、Superdex 200凝胶柱层析等步骤，从黑曲霉发酵液中纯化得到两种β–葡萄糖苷酶蛋白，其相对分子质量分别为1.15×105和7.0×104左右，比活力分别为62.1,U/mg(相对分子质量约为1.15×105)和53.0,U/mg(相对分子质量约为7.0×104)，纯化倍数分别为1.54和1.31，回收率分别为19.6%,和19.1%，β–葡萄糖苷酶最适水解pH为4.6，最适反应温度为50～55,℃．在pH 4.2～4.8、温度40～60,℃下均能保持稳定．Mn2+、Mg2+和K+对β–葡萄糖苷酶有不同程度的激活作用，而Ca2+、Fe3+、Zn2+、Cu2+和Fe2+会抑制β–葡萄糖苷酶的酶活，Na+和Ba2+对β–葡萄糖苷酶活力影响不明显．以pNPG为底物时，该酶的Km和vmax分别为2.33,mmol/L与3.14,mmol/(L·min)．