重组大肠杆菌全细胞合成苯基乳酸的研究

• 作者: 吉华兰 朱益波 沈丽 王立梅 罗林 胡发根 齐斌
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 大肠杆菌 D-乳酸脱氢酶 苯基乳酸 全细胞生物转化
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 147-151,157
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2015.09.024

摘要

在E.coli BL21(DE3)中过量表达D-乳酸脱氢酶基因(D-ldh),并优化该重组菌全细胞转化苯丙酮酸钠合成苯基乳酸的条件.通过单因素实验和正交实验优化诱导表达条件,并在此基础上对全细胞转化苯丙酮酸钠合成苯基乳酸进行了优化.结果表明,菌体OD600为1.2时添加IPTG至终浓度0.2mmol/L,25℃诱导4h后收集菌体具有最佳转化活性;最优分批转化条件:pH7.0,8.0#L苯丙酮酸钠,20g/L葡萄糖,1％ (v/v)吐温-80,菌体浓度20g/L(干重),37℃,转速200r/min转化0.5h,苯基乳酸产量和转化率分别达到4.91g/L,56％.在上述优化条件上通过流加苯丙酮酸钠和葡萄糖,经6h转化,苯基乳酸最终产量达到17.23g/L,转化率为54％.研究结果表明该重组大肠杆菌成功转化苯丙酮酸合成苯基乳酸,具有较好的应用前景,为系统化代谢工程改造大肠杆菌生物合成苯基乳酸的进一步研究和应用提供了有用的技术参数.