一种新型融合蛋白RANKL-Fc的表达和纯化

• 作者: 何彬 刘亭 李勇军 王永林 王爱民 王红勋 王静娴
• 来源期刊: 中国新药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转录因子NF-κB受体激动剂配体 人源免疫球蛋白IgG Fc 融合蛋白RANKL-Fc
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 439-442
• 页数: 4页
• 分类号: R914.5
• 语种: 中文

摘要

目的:研究一种新型融合蛋白核转录因子NF-κB受体激动剂配体-免疫球蛋白Fc(RANKL-Fc)的表达和纯化.方法:通过聚合酶链反应(PCR)将RANKL (140 ～317)蛋白片段的DNA片段和人源免疫球蛋白IgG Fc (1～232)片段的DNA片段放大,并把它们同时亚克隆到哺乳动物细胞表达载体(PCDNA3.1).将构建好的表达载体在哺乳动物CHO细胞进行表达、纯化.通过细胞染色和流式细胞仪分析融合蛋白RANKL-Fc分别与RANKL,Fc RⅡ相互作用.结果和结论:在CHO-K1细胞中成功表达融合蛋白RANKL-Fc,该蛋白纯化纯度超过90％.融合蛋白RANKL-Fc能分别与RANKL,Fc RⅡ相互作用,结果表明该融合蛋白是以RANKL/RANK通路为靶向的潜在的活性蛋白.