鸭肠炎病毒C-KCE株TK基因的原核表达及其多克隆抗体的制备

• 作者: 张文龙 母晓宇 王君伟 田荔 董井泉 赵宇 马波 高明春
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭肠炎病毒(DEV) TK基因 原核表达 多克隆抗体 Western-blot 间接免疫荧光试验
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 兽医科学
• 页码范围: 154-157,269
• 页数: 5页
• 分类号: S858.32|Q786
• 语种: 中文

摘要

为了探究鸭肠炎病毒(DEV) TK基因编码蛋白在相关细胞上作用与功能及其在病毒感染周期、机体免疫应答中的作用,试验以DEV C-KCE株基因组DNA为模板扩增获得TK基因,在pET-32a(+)/Rosetta(DE3) pLys系统中原核表达,并用IPTG诱导DEV TK重组蛋白.结果表明:经SDS-PAGE分析,外源基因主要以包涵体形式表达,分子质量约为59 ku;经Ni-NTA纯化后免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,抗体效价可达到1:4;经Western-blot分析,制备的多克隆抗体可特异性识别重组蛋白;间接免疫荧光试验证实,制备的多克隆抗体与DEV的TK基因编码产物反应性良好.说明TK基因表达蛋白在鸭肠炎感染周期及机体的免疫应答中发挥着至关重要的作用.