莱茵衣藻IFT139蛋白抗原的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

• 作者: 孟德梅 李镇芳 樊振川 田伟 董彬
• 来源期刊: 天津科技大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 莱茵衣藻 纤毛 IFT139 表达纯化 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 【食品与生物技术】
• 页码范围: 27-33
• 页数: 7页
• 分类号: Q786
• 字数: 4493字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13364/j.issn.1672-6510.20160029

摘要

IFT139是莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)纤毛内运输蛋白IFT复合物A中的一个重要组分．其编码基因的突变、缺失或沉默将会影响纤毛正常的组装和解聚，进而导致纤毛病的产生．为深入研究 IFT139的作用机制，本实验首先PCR获得ift1395′端458 bp的EST片断，成功构建了pMAL-c2-ift139与pET-28a(＋)-ift139重组质粒．然后将重组质粒转入大肠杆菌(E. coli)BL21(DE3)，通过IPTG诱导表达，分别得到相对分子质量为6.0×104和2.5×104的重组MBP/HIS-IFT139融合蛋白．进一步将亲和纯化的MBP-IFT139融合蛋白(纯度95%,以上)，免疫新西兰大白兔获得抗血清，间接ELISA法测得血清效价为1﹕256,000．最后将抗血清依次经Protein A和硝酸纤维素膜纯化后，用Western blot检测抗体特异性，结果显示所制备抗体能够正确特异性识别莱茵衣藻中的IFT139，从而为IFT139作用机制的阐明和纤毛相关疾病的研究奠定了重要基础．

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董彬	食品营养与安全教育部重点实验室天津科技大学食品工程与生物技术学院	2	11	2.0	2.0
2	孟德梅	食品营养与安全教育部重点实验室天津科技大学食品工程与生物技术学院	2	11	2.0	2.0
6	田伟	食品营养与安全教育部重点实验室天津科技大学食品工程与生物技术学院	1	8	1.0	1.0
7	李镇芳	食品营养与安全教育部重点实验室天津科技大学食品工程与生物技术学院	1	8	1.0	1.0