黄颡鱼长型肽聚糖识别蛋白（pfPGRP－L）原核表达和多克隆抗体的制备

• 作者: 刘毅 杨竹青 熊六凤 王自蕊 钟烈鹏 隗黎丽
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 长型肽聚糖识别蛋白 原核表达 多克隆抗体 黄颡鱼
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 723-728
• 页数: 6页
• 分类号: S965.199
• 字数: 4217字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13836/j.jjau.2016103

摘要

为进一步研究肽聚糖识别蛋白（peptidoglycan recognition proteins，PGRPs）在先天性免疫应答中的生物学功能，在前期克隆黄颡鱼长型肽聚糖识别蛋白（pfPGRP－L） cDNA 全长的基础上，根据 pfPGRP－L 基因中高亲水性区域序列设计特异性引物扩增出编码序列，将该基因片段克隆到 pGEX－4T－1质粒，构建重组表达载体。SDS－PAGE 电泳检测该目的蛋白大小约为51 ku，与理论值大小符合，回收蛋白并纯化，与弗氏佐剂等量混合后注射新西兰大白兔制备多克隆抗体，用 ELISA 和 Western blotting 分别检测该抗体，结果显示：抗体效价可达1∶256000，且有特异性条带，表明 pfPGRP－L 的多克隆抗体制备成功。此外，Western blotting 检测黄颡鱼不同组织 pfPGRP－L 蛋白的表达，发现在鳃、胸腺、肝脏、肾脏、头肾、脾脏、血液和肠道等不同组织中都有目的条带，而在脾脏和肠道中表达更强。为 pfPGRP－L 的抗菌作用和功能研究奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王自蕊	江西农业大学动物科学技术学院	55	355	10.0	17.0
2	熊六凤	江西农业大学动物科学技术学院	36	90	5.0	8.0
3	杨竹青	江西农业大学动物科学技术学院	15	85	6.0	9.0
4	隗黎丽	江西农业大学动物科学技术学院	34	170	8.0	11.0
5	刘毅	江西师范大学生命学院	16	49	5.0	6.0
6	钟烈鹏	江西农业大学动物科学技术学院	1	0	0.0	0.0