基于PCR方法对载体pBluescriptⅡSK(+)及pCAMBⅠA1300的定点突变

• 作者: 刘晓东 刘超 李继洋 林琪 蒲艳
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: pBluescriptⅡSK(+) pCAMBⅠA1300 定点突变 PCR
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 页码范围: 83-87
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3269字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2016.06.013

摘要

运用PCR定点突变技术对载体pBluescriptⅡSK(+)以及植物表达载体pCAMB Ⅰ A1300多克隆位点内相关的酶切位点进行改造,为运用CRISPR/Cas9基因编辑载体在构建敲除体系时提供更多便捷可用的酶切位点.通过酶切鉴定以及测序表明,成功将pBluescriptⅡSK(+)载体多克隆位点内Xho Ⅰ、EcoR V、Sma Ⅰ、SacⅡ4个酶切位点,分别改造为Nhe Ⅰ、MfeⅠ、Nsi Ⅰ、Pac Ⅰ;将pCAMB Ⅰ A1300植物表达载体多克隆位点内的Sac Ⅰ、Sal Ⅰ以2个酶切位点分别改造为Nsi Ⅰ、Pac Ⅰ,为今后构建CRISPR/Cas9基因组编辑载体及对植物功能基因进行精准定位研究奠定一定的理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘超	新疆农业大学农学院农业生物技术重点实验室	38	91	5.0	7.0
2	刘晓东	新疆农业大学农学院农业生物技术重点实验室	18	42	4.0	6.0
3	李继洋	新疆农业大学农学院农业生物技术重点实验室	8	31	3.0	5.0
4	林琪	新疆农业大学农学院农业生物技术重点实验室	5	3	1.0	1.0
5	蒲艳	新疆农业大学农学院农业生物技术重点实验室	2	4	1.0	2.0