HnRNPA2/B1shRNA慢病毒载体感染Hela细胞的稳定株筛选

• 作者: 刘瑶 方文 石祥
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: RNA干扰 短发夹RNA 宫颈癌 Hela细胞 慢病毒 不均一核糖核蛋白基因
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 625-629
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 字数: 3646字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.1000-2707.2016.06.002

摘要

目的:筛选不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2/B1)的短发夹RNA (shRNA)慢病毒载体感染宫颈癌细胞株Hela细胞的稳定细胞株.方法:利用hnRNPA2/B1 shRNA慢病毒载体转染Hela细胞,采用嘌呤霉素抗性方法筛选稳定转染的Hela细胞系;将Hela细胞分为空白组(Hela)、阴性组(NC-shRNA)、干扰组1(shRNA1)、干扰组2(shRNA2)、干扰组3(shRNA3)和干扰组4(shRNA4),实时荧光定量PCR (RT-PCR)检测各组细胞hnRNPA2/B1 mRNA表达水平,Western blot检测hnRNPA2/B1蛋白表达水平,筛选干扰沉默效率最高的细胞作为稳定沉默hnRNPA2/B1基因的稳转株.结果:经筛选获得稳定转染的宫颈癌Hela细胞株,干扰组2,干扰组3和干扰组4与空白组比较,hnRNPA2/B1基因和蛋白表达量降低,差异有统计学意义(P＜0.05),其中干扰组4沉默效率最高.结论:成功构建hnRNPA2/B1 shRNA慢病毒载体感染的Hela稳定细胞株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘瑶	贵州医科大学临床生化教研室	13	22	3.0	3.0
2	石祥	贵州医科大学临床生化教研室	3	5	2.0	2.0
3	方文	贵州医科大学临床生化教研室	6	20	3.0	4.0