环糊精糖基转移酶定点突变及其产物特异性分析

• 作者: 凌凯 刘鹏飞 张洪斌 胡雪芹
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 环糊精糖基转移酶 定点突变 产物特异性
• 年，卷（期）: 2016,（17）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 133-138
• 页数: 6页
• 分类号: Q814
• 字数: 4221字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201617022

摘要

环糊精葡萄糖基转移酶(cyclodextrin glycosyltransferase,CGTase)是一种多功能酶,能够催化淀粉生成环糊精(cyclodextrin,CD),本研究考察了Bacillus cereus的CGTase活性区域43位氨基酸与CGTase酶活力及其催化玉米淀粉形成γ-CD能力的联系.实验中共构建17株突变株,并在大肠杆菌BL21中实现异源表达.结果表明:相比于原始酶,H43E、H43F、H43W、H43Y突变酶的活力均有所提高;产物特异性方面,除H43W突变酶外,其余突变酶的催化产物中γ-CD比例均有所升高,将43位组氨酸突变成脯氨酸、异亮氨酸和苏氨酸后得到的突变酶作用于玉米淀粉,酶的催化产物中-CD含量均下降,y-CD含量由20％分别升高到30.2％、28.4％、29.2％,实际产量由4.76 g/L升高到7.64、6.05、6.29 g/L,由此可见acillus cereus的CGTase活性区域中43位氨基酸对于CGTase的活力和产物特异性具有重要影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张洪斌	合肥工业大学生物与医学工程学院	59	436	13.0	17.0
2	胡雪芹	合肥工业大学生物与医学工程学院	35	219	9.0	12.0
3	凌凯	合肥工业大学生物与医学工程学院	2	6	2.0	2.0
4	刘鹏飞	合肥工业大学生物与医学工程学院	5	23	2.0	4.0