引入疏水性氨基酸对GH11家族木聚糖酶热稳定性的影响

• 作者: 周晨妍 朱新术 李同彪 王丹丹
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 木聚糖酶 热稳定性 α-螺旋 疏水性 定点突变
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 145-148,152
• 分类号: TS201.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2016.01.021

摘要

生物信息学预测黑曲霉(Aspergillus niger) XZ-3S木聚糖酶XynZF-2的催化活性中心位点,并在α-螺旋处引入疏水性氨基酸以提高木聚糖酶XynZF-2的热稳定性.通过定点突变活性位点E103D、E194D,构建突变基因xynED.同时,将α-螺旋处氨基酸Val125、Lys178和Gly180分别突变为疏水性氨基酸Ala、Met和Ala,构建突变基因xynMA.突变基因xynED和xynMA在大肠杆菌BL21中表达发现,突变酶XynED酶活性为原酶XynZF-2的0.17％;突变酶XynMA最适温度由原来的40℃提高到了48 ℃;在40℃条件下保温1h,突变酶XynMA酶活性仍高达74.71％(原酶XynZF-2为44.36％);突变酶XynMA的半衰期t45℃1/2从原来的7 min提高到了19 min.因此,Glu103和Glu194为木聚糖酶XynZF-2的催化活性中心位点,且在木聚糖酶XynZF-2α-螺旋处引入疏水性氨基酸能大大提高其热稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丹丹	新乡医学院生命科学技术学院	16	43	4.0	6.0
5	周晨妍	新乡医学院生命科学技术学院	31	86	5.0	7.0
6	朱新术	新乡医学院生命科学技术学院	6	32	4.0	5.0
7	李同彪	新乡医学院生命科学技术学院	8	45	5.0	6.0