稳定表达可视化hFcRn的MDCK细胞株构建

• 作者: 周兵 夏宁邵 康赐明 游敏 王一文 罗文新 陈远志
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 慢病毒表达载体 EGFP 新生儿Fc受体 MDCK pH依赖性
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 123-128
• 页数: 6页
• 分类号: Q87
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2017.02.0021

摘要

[目的]建立稳定表达融合EGFP的人新生儿Fc受体(hFcRn)的MDCK细胞株.[方法]构建重组慢病毒质粒pEGFP-hFcRn,采用四质粒包装系统共转染HEK 293T细胞生产重组慢病毒,感染MDCK细胞后对EGFP阳性细胞进行流式单细胞分选;通过Western Blot及EGFP-β2m荧光共定位验证hFcRn的完整性,并用流式细胞仪检测hFcRn与人IgG的结合活性.[结果]测序结果表明成功构建pEGFP-FcRn慢病毒表达载体;感染后EGFP阳性MDCK细胞比例约为26.5％,流式单细胞分选后得到纯阳性细胞;荧光共定位及Western Blot均检测到hFcRn的完整表达;流式分析表明细胞株上的hFcRn与IgG存在pH依赖性结合.[结论]成功获得稳定表达具有生物活性的可视化hFcRn的MDCK细胞株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏宁邵		87	628	14.0	23.0
2	罗文新		20	166	6.0	12.0
3	陈远志		4	7	2.0	2.0
4	康赐明		2	3	1.0	1.0
5	王一文		1	0	0.0	0.0
6	周兵		1	0	0.0	0.0
7	游敏		1	0	0.0	0.0