低温脱脂大豆粕的低丰度蛋白提取和高丰度蛋白去除条件的优化

• 来源期刊: 浙江大学学报（英文版）（B辑：生物医学和生物技术）
• 学科: 生物学
• 关键词: 蛋白提取 高丰度蛋白 低丰度蛋白 低温脱脂豆粕 质谱
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 页码范围: 878-885
• 页数: 8页
• 分类号: Q819
• 语种: 英文

摘要

目的:优化低温脱脂大豆粕中的低丰度蛋白提取和高丰度蛋白去除条件,为进一步探讨大豆低丰度蛋白对动物的生理功能影响提供试验材料.创新点:结合提取时间和异丙醇浓度,将超声波(超声时间、功率)用于辅助异丙醇去除大豆高丰度蛋白和富集低丰度蛋白的研究.方法:在单因素试验基础上,设计了超声时间、超声功率、提取时间和异丙醇浓度等四因素三水平的正交试验.并通过测定提取液中的蛋白浓度和通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、质谱分析(MS)等蛋白质组学手段鉴定提取液或丙酮沉淀物中的蛋白质含量,实现了大豆高丰度蛋白去除和低丰度蛋白提取条件的优化.结论:50%异丙醇,350 W超声15 min,提取1 h是大豆低丰度蛋白提取的最佳条件.提取物含多种低丰度蛋白(油质蛋白、大豆未知蛋白、磷酸酯D和无特征大豆蛋白),且无大豆高丰度蛋白(大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白).