利用CRISPR/Cas9技术构建GLRX3基因敲除的HEK293细胞系

• 作者: 代鑫 夏海滨 杨沛艳 赵俊丽
• 来源期刊: 陕西师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: GLRX3 CRISPR/Cas9系统 基因敲除 基因编辑
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 71-77
• 页数: 7页
• 分类号: R393
• 字数: 4816字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15983/j.cnki.jsnu.2017.01.315

摘要

为了构建GLRX3(Glutaredoxin 3)敲除的HEK293细胞系,根据该蛋白结构特性设计了靶向于GLRX3基因Exon5的4个sgRNA,并通过T7E1检测确认了所设计sgRNA的有效性.将携带Cas9及靶向hGLRX3-Exon5的sgRNA1的打靶载体转染HEK293,通过药物Puromycin和细胞克隆化筛选出稳定GLRX3基因敲除的HEK293细胞株,并通过测序确定GLRX3两个等位基因均发生移码突变.通过免疫印迹在蛋白表达水平确认了该基因的敲除.利用CRISPR/Cas9技术成功构建了GLRX3敲除的HEK293细胞株,其为探索GLRX3的功能和作用机制提供了有效的细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏海滨	陕西师范大学生命科学学院	45	117	6.0	9.0
2	赵俊丽	陕西师范大学生命科学学院	10	11	2.0	2.0
3	杨沛艳	陕西师范大学生命科学学院	3	3	1.0	1.0
4	代鑫	陕西师范大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0