人巨细胞病毒UL135蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备和鉴定

• 作者: 叶思思 吕杰强 孙祥威 毛晨晨 胡盈盈 薛向阳 郭刚强
• 来源期刊: 温州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒 UL135蛋白 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 336-341
• 页数: 6页
• 分类号: R373.9
• 字数: 4957字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-9400.2017.05.005

摘要

目的:制备人巨细胞病毒(HCMV)UL135原核表达蛋白及其多克隆抗体.方法:生物信息学分析HCMV UL135蛋白的跨膜区结构,经原核密码子优化后对胞外序列进行全基因合成,将序列克隆至原核表达载体构建pET21a(+)/HCMV UL135重组质粒,IPTG诱导蛋白表达后,Ni-NTA亲和层析法纯化UL135重组蛋白,免疫新西兰兔制备多克隆抗体,ELISA、Western blot法检测抗体灵敏度和特异性.结果:HCMV的UL135基因在原核表达系统中成功表达,经Ni-NTA亲和纯化后获得高纯度的目的蛋白;免疫新西兰兔诱导产生特异性的多克隆IgG抗体,且效价为1:12800;经ELISA以及Western blot证实制备的兔抗多克隆抗体可特异性识别UL135蛋白.结论:成功实现了HCMV UL135的重组表达并制备了UL135兔多克隆抗体,为进一步研究UL135蛋白的生物学功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕杰强	温州医科大学附属第二医院妇产科	95	500	12.0	17.0
2	薛向阳	温州医科大学分子病毒与免疫研究所	25	53	3.0	6.0
3	毛晨晨	温州医科大学附属第一医院胃肠外科	3	2	1.0	1.0
4	叶思思	温州医科大学分子病毒与免疫研究所	2	1	1.0	1.0
5	郭刚强	温州医科大学分子病毒与免疫研究所	5	2	1.0	1.0
6	胡盈盈	温州医科大学附属第二医院妇产科	2	1	1.0	1.0
7	孙祥威	温州医科大学附属第一医院胃肠外科	1	1	1.0	1.0