β-伴大豆球蛋白的N-糖基化位点及其N-糖链的质谱分析

• 作者: 晋万军 李玲梅 柳人丹 温娅楠 王仲孚 王承健 韩健利 魏明 黄琳娟
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 化学
• 关键词: β-伴大豆球蛋白 糖基化位点 N-糖链 质谱
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 分析化学
• 页码范围: 427-434
• 页数: 8页
• 分类号: O657.6|O629.12
• 字数: 5812字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7503/cjcu20170584

摘要

以β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin)为研究对象,利用Trypsin和Pepsin酶对其进行水解,以Con A亲和层析柱富集纯化糖肽,并用糖苷酶PNGase F和Endo H分别酶解糖肽,再采用电喷雾质谱(ESI-MS)和串联质谱(MS/MS)对所得肽段的氨基酸序列及糖链的结构进行了分析,最后通过数据库检索对分析结果进行验证.结果表明,β-conglycinin具有5个N-糖基化位点,分别为α亚基的199和455位天冬酰胺(Asn),α′亚基的215和489位Asn及β亚基的326位Asn,且每个糖基化位点均被H5N2,H6N2,H7N2和H8N2这4种高甘露糖型N-糖链所修饰.本研究为各种糖蛋白的糖基化位点及其对应的糖链结构的鉴定分析提供了方法参考,并为深入理解大豆糖蛋白抗原表位的特异性及致敏机理提供了依据.