白念珠菌翻译起始因子蛋白Ca-tif1的表达和纯化

• 作者: 姜静 曹张军 蒋晨晓
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: 白色念珠菌 Ca-tif1 基因表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 研究与应用
• 页码范围: 42-46
• 页数: 5页
• 字数: 3075字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2018.02.008

摘要

本文构建了白色念珠菌体内翻译起始因子Ca-tif1的原核表达载体,纯化Ca-tif1蛋白,并测定其ATP酶活性.采用化学合成Ca-tif1序列片段,酶切并与pET28a载体对应位点连接,连接后载体转化BL21感受态细胞,IPTG诱导Ca-tif1表达,用镍离子亲和层析柱纯化目的蛋白,并采用孔雀绿-磷钼酸分光光度法测定目的蛋白ATP酶活性.结果显示,根据大肠杆菌密码子偏好性进行密码子优化的重组质粒pET-28a-Ca-tif1顺利表达可溶性的目的蛋白Ca-tif1,每升大肠杆菌表达产物经纯化后得到Ca-tif1 7.0 mg,纯化后的Ca-tif1具有ATP酶活性,1.25×106 U/mg.通过成功构建白色念珠菌翻译起始因子Ca-tif1的原核表达载体pET-28a-Ca-tif1,高效表达并纯化了Ca-tif1,经测定Ca-tif1具有ATP酶活性,为基于白色念珠菌翻译起始因子的一系列研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹张军	东华大学化学化工与生物工程学院	47	163	6.0	11.0
2	姜静	东华大学化学化工与生物工程学院	3	2	1.0	1.0
3	蒋晨晓	复旦大学基础医学院	1	0	0.0	0.0