sucA缺失型大肠杆菌菌株的构建与发酵条件优化

• 作者: 于林 孙付保 张震宇 林凡
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 工学
• 关键词: 反式-4-羟脯氨酸 sucA 透明颤菌血红蛋白 基因敲除 重组大肠杆菌 全细胞酶活
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 830-837
• 页数: 8页
• 分类号: TQ920.1
• 字数: 4283字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2018.08.008

摘要

反式-4-羟脯氨酸在多领域具有重要应用价值.为了进一步提高反式-4-羟脯氨酸的产量,在已构建好的E.coli BL21 (DE3)△putA的基础上,敲除基因sucA的同时插入密码子优化后的反式-4-羟化酶基因(hyp),并将构建好的质粒pUC19-ptrp2-hyp-vgb导入该基因敲除菌株中.之后在摇瓶水平上,单因素优化发酵条件与发酵培养基的组分,并通过正交实验进一步确定敲除菌株的培养条件.结果表明:与含有同样质粒的原菌和两种单敲除菌E coli BL21 (DE3)△sucA、E coli BL21 (DE3)△putA相比,E.coli BL21 (DE3)△putA△sucA双敲除菌具有最高的全细胞酶活,大约是原菌的2.6倍;在摇瓶水平上,发酵条件优化后,以100 mmol/L的L-脯氨酸为底物进行发酵,12 h后可得到1.08 g/L的羟脯氨酸,是优化前的3.87倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张震宇	江南大学生物工程学院	18	41	3.0	6.0
4	孙付保	江南大学生物工程学院	20	41	4.0	5.0
10	林凡	江南大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0
28	于林		1	0	0.0	0.0