代谢工程大肠杆菌高效利用甘油合成丁二酸

• 作者: 刘晓光 李卓亚 王杰 王正祥 田康明 董自星 金鹏
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 丁二酸 大肠杆菌 温敏型启动子 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 两阶段发酵法
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 94-100
• 页数: 7页
• 分类号: TS201.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2018.05.018

摘要

为了构建高产丁二酸的重组大肠杆菌,以删除了乙酸激酶和磷酸乙酰转移酶基因(ackA-pta)、乳酸脱氢酶基因(ldhA)和丙酮酸甲酸裂解酶基因(pflB)的大肠杆菌CICIM B0013-025为出发菌株,将其磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(ppc)基因的启动子替换为温度诱导的λ噬菌体启动子PC-PR,获得温度调控型的丁二酸合成菌株B0013-026.继而通过发酵条件优化,建立了两阶段发酵法:菌株的生长温度和诱导温度分别为37和42℃,以甘油为碳源并添加入5 g/L蛋白胨,发酵产酸阶段在微供氧(100 r/min)条件下进行.在5L发酵罐中采用最优条件进行发酵,丁二酸的产量、生产强度和甘油转化率分别为62.5g/L、1.04g/(L·h)和64.2％,而且发酵液中仅有少量的α-酮戊二酸(3.0g/L)和乙酸(1.8 g/L)等副产物积累,实现了以甘油为唯一碳源高效合成丁二酸,为其工业化生产提供了重要参考.