人DNase I的表达、纯化及降解NETs活性研究

• 作者: 吴洁 梁艺璇
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 脱氧核糖核酸酶Ⅰ 中性粒细胞胞外诱捕网 分离纯化 His标签
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 93-99
• 页数: 7页
• 分类号: Q789
• 字数: 4363字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20190113

摘要

为获得纯度较高的人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase I)以研究其对中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)的降解作用,构建基因工程表达菌E.coli Rosetta(DE3)/pET32a-His-DNase I,乳糖诱导表达,经镍柱亲和纯化获得融合蛋白His-DNase I.提取小鼠中性粒细胞,用佛波酯PMA刺激形成NETs,SytoxGreen及荧光显微镜检测融合蛋白对NETs的降解活性.结果表明,成功构建人DNase I基因克隆并在原核细胞中实现高效表达,纯化的His-DNase I具备较高的核酸酶活性.本研究为进一步探究DNase I的临床应用奠定了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴洁	中国药科大学生命科学与技术学院酶工程实验室	53	285	6.0	16.0
2	梁艺璇	中国药科大学生命科学与技术学院酶工程实验室	1	0	0.0	0.0