摘要:
[目的]研究乙烯(ETH)和1-甲基环丙烯(1-MCP)处理对菠萝蜜果实成熟过程中醇酰基转移酶(AAT)活性、AheAAT和AheERF1/2转录因子表达的影响,为进一步认识菠萝蜜果实AATs在酯类物质合成中的作用及其调控提供理论依据.[方法]以‘海大2号’菠萝蜜果实为试材,果实盛花期选择具有代表性、花期一致的果实挂牌,花后约150d采收,选择大小和成熟度相同,且无病虫伤的果实,分成3组进行处理.第一组采用1 000 mmg·L-1ETH溶液浸泡2-3 min;第二组采用0.5 mg·L-1 1-MCP熏蒸处理15 h;第三组作为对照组.在果实成熟过程中定期取样,每次取样3-5个果,测定AAT酶活性、AheAAT和AheERF表达等指标.[结果]通过测定AAT酶活性发现,ETH处理促进了果实的成熟衰老,提前了AAT活性高峰出现的时间,但是降低了酶活性.1-MCP处理抑制了果实成熟衰老,在贮藏前期抑制了AAT的活性,延迟了AAT活性高峰出现的时间,并显著降低了AAT的活性.对AheAAT序列分析发现,其全长1 380 bp,编码459个氨基酸.AheAAT具有酰基转移酶的保守结构域H-x-x-x-D和L-x-x-YYPLAGR活性位点基序,D(N)F(V) GWG附加基序,属于BAHD醇酰基转移酶家族,其氨基酸序列与苹果和梨的相似性最高.同时,从菠萝蜜果实中克隆获得2个ERF转录因子,分别命名为AheERF1/2,其中AheERF1全长648 bp,编码215个氨基酸,与苹果和菜豆的同源性最高;AheERF2全长657 bp,编码218个氨基酸,与苹果、番木瓜的同源性最高.AheERF1/2的氨基酸序列含有64/65个氨基酸残基组成的AP2/ERF保守序列,具有ERF家族转录因子的特征序列.ETH处理使果实中AheAAT表达高峰提前出现,并且下调了AheAAT的表达.ETH处理对AheERF1/2转录因子的影响与AheAAT相同,并且ETH降低了AheERF1/2转录因子与AheAAT的相关性.1-MCP处理延长了菠萝蜜果实的贮藏期.在1-MCP处理后的贮藏前期,AheAAT和AheERF1/2转录因子的表达呈现显著降低.当AheAA7T和AheERF1/2转录因子出现表达高峰时,1-MCP下调了它们的表达.然而,1-MCP对AheERF1/2转录因子与AheAAT的相关性几乎无影响.[结论]ETH处理提前了AAT的活性高峰及AheAAT和AheERF1/2转录因子的表达高峰,降低了AAT的活性,下调了AheAAT和AheERF1/2转录因子的表达,降低了AheAAT与AheERF2转录因子的相关性.1-MCP处理在贮藏前期抑制了AAT的活性及AheAAT和AheERF1/2转录因子的表达,在贮藏后期降低了AAT的活性,下调了AheAAT和AheERF1/2转录因子的表达量.