Picrophilus Torridus嗜热酯酶的克隆表达及性质研究

• 作者: 张兴群 张晓彦 杜晓韵
• 来源期刊: 食品与药品
• 学科: 生物学
• 关键词: 邻苯二甲酸酯 嗜热酯酶 酶学性质
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 169-173
• 页数: 5页
• 分类号: Q815
• 字数: 3427字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-979X.2019.03.001

摘要

目的 目的以Picrophilus torridus DSM9790基因组为模板,克隆嗜热酯酶EstPt 1的基因,实现其在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达,并对重组EstPt 1进行酶学性质表征.方法 利用PCR扩增,获得EstPt 1基因,连接到pET-28a(+)质粒,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,构建重组工程菌株.通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),对硝基苯酚法(pNPB),薄层色谱(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)对EstPt 1的性质进行研究.结果 EstPt 1成功表达,分子量为35 kD;最适反应温度为85℃,最适pH 9.0,有良好的热稳定性和酶活,能在24 h内完全降解5 mmol/L邻苯二甲酸二丁酯(DBP).结论 重组EstPt 1有很强的高温耐受性和稳定性,以及良好的DBP降解活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张兴群	东华大学化学化工与生物工程学院	32	106	6.0	8.0
2	张晓彦	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	9	59	5.0	7.0
3	杜晓韵	东华大学化学化工与生物工程学院	1	0	0.0	0.0