一种嗜热型碳酸酐酶基因的克隆表达及酶学性质

• 作者: 张朝晖 马晓舟
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: Methanocella conradii HZ254 嗜热型碳酸酐酶 克隆表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 研究与应用
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 字数: 4485字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2015.04.001

摘要

本文将嗜热菌Methanocella conradii HZ254的β型碳酸酐酶基因mtc在大肠杆菌中进行了克隆和表达.将PCR扩增得到mtc基因与pET-24a(+)载体进行连接,转入大肠杆菌JM109中,得到工程菌JM109-pET24a-mtc.诱导表达后做SDS-PAGE电泳,显示有与预期分子量大小相近的(约29 kDa)产物条带.该表达产物具有催化CO2水合的活性,但没有酯酶活力.研究表明,重组酶在40℃下稳定,40℃～60℃对酶有激活作用,65℃以上会导致酶的失活.在pH 7.0时,酶有最好的pH稳定性.1 mmol/L的Fe2+、Mg2+、Mn2+和Ca2+均对酶有激活作用,而Cu2+则有明显的抑制作用.1 mmol/L的F-对酶活没有明显的影响,而磺胺和I-则有比较明显的抑制作用,Br-、HCO3-、C1-、NO3-和SO42-对酶均有一定的抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张朝晖	浙江工业大学生物与环境工程学院	62	616	13.0	22.0
2	马晓舟	浙江工业大学生物与环境工程学院	2	7	2.0	2.0