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新型嗜热耐碱脂肪酶的纯化表征及应用
新型嗜热耐碱脂肪酶的纯化表征及应用
作者:
张昕怡
许蕊
王钰棋
张瑜
王飞
李迅
原文服务方:
化工学报
生物催化
生物柴油
生物燃料
脂肪酶
嗜热耐碱酶
酶学性质
摘要:
将来源于解脂嗜热互营杆菌(Thermosyntropha lipolytica)的脂肪酶(TlLipA)基因tll1导入大肠杆菌BL21(DE3)中表达,通过热处理和镍柱亲和层析获得纯酶,并对其酶学性质进行研究。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示TlLipA分子量为53×103,其最适反应温度为65℃,最适反应pH为8.0。在55~65℃范围内酶活较高且比较稳定;在pH7.0~11.0于室温保存1 h后,残留相对酶活仍达80%以上。1mmol/L 金属离子Zn2+、Fe3+和试剂SDS,0.05%(质量分数)Tween 80,对酶活力具有强烈的抑制作用,残留相对酶活皆低于15%;1mmol/L Mg2+、Mn2+对酶活力表现出轻微的激活作用。由底物专一性实验可得,该酶对辛酸对硝基苯酯(C8)和癸酸对硝基苯酯(C10)偏好明显。以棕榈酸对硝基苯酯(p-NPP)为底物,该酶动力学参数Km值为0.23mmol/L,Vmax为33.50mmol/(L·min),kcat为22.83 S-1。以重组脂肪酶为催化剂在无溶剂体系中制备生物柴油,含水率20%,酶加量200U/g油,醇油比为4∶1的条件下,在55℃催化大豆油反应48h,收率可达91.75%。
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文献信息
篇名
新型嗜热耐碱脂肪酶的纯化表征及应用
来源期刊
化工学报
学科
关键词
生物催化
生物柴油
生物燃料
脂肪酶
嗜热耐碱酶
酶学性质
年,卷(期)
2021,(11)
所属期刊栏目
生物化学工程与技术
研究方向
页码范围
5246-5255
页数
9页
分类号
Q81
字数
语种
中文
DOI
10.11949/0438-1157.20200285
五维指标
传播情况
被引次数趋势
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生物柴油
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研究来源
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研究去脉
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相关学者/机构
期刊影响力
化工学报
主办单位:
中国化工学会
出版周期:
月刊
ISSN:
0438-1157
CN:
11-1946/TQ
开本:
大16开
出版地:
邮发代号:
创刊时间:
1923-01-01
语种:
chi
出版文献量(篇)
11879
总下载数(次)
0
总被引数(次)
117834
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