葡萄糖3脱氢酶工程菌的构建、表达及其合成 3酮对硝基苯井冈霉胺

• 作者: 张建芬 柯薇 陈虹
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: 葡萄糖3脱氢酶 基因挖掘 3酮对硝基苯井冈霉胺 细胞转化
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 94-98
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3909字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2019.01.012

摘要

采用基因挖掘技术,从NCBI数据库发现来源于Glaciecola polaris的葡萄糖3脱氢酶基因,该基因经密码子优化后合成,构建pET28b GpG3DH重组表达载体,转入大肠杆菌E.coli BL21中进行重组表达,结果显示:GpG3DH实现了部分可溶表达,其分子量为5.5×104.随后,优化了GpG3DH的表达条件,结果发现,重组菌在TB培养基中37℃ 培养至OD600为0.8时,加入IPTG至终浓度为0.5 mmol/L,16℃ 诱导表达10 h,GpG3DH酶活为2.83×10-2 U/mL.进一步将重组菌用于3酮对硝基苯井冈霉胺的细胞转化法合成,细胞用10 mmol/L的EDTA处理,在pH为7.5、25℃ 的条件下转化32 h,3酮对硝基苯井冈霉胺的产率(Y3 K p NPV)为0.54.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈虹	浙江树人大学生物与环境工程学院	37	210	7.0	14.0
2	柯薇	浙江树人大学生物与环境工程学院	16	23	3.0	4.0
3	张建芬	浙江树人大学生物与环境工程学院	26	22	3.0	4.0