猪YTHDF2蛋白原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 周继勇 张宇 杜柳阳 顾金燕 黄童
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪YTHDF2 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 90-95
• 页数: 6页
• 分类号: S852
• 字数: 4671字
• 语种: 中文

摘要

YTH家族蛋白2(YTH domain-containing family protein,YTHDF2)作为一种m6A修饰的结合蛋白,可对底物mRNA的剪接,翻译,降解等过程进行调控.本研究通过RT-PCR首次获得了猪YTHDF2编码基因序列,全长1 743 bp,编码580个氨基酸,基因进化树分析显示该基因在各物种间保守性较高.将猪YTHDF2编码基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,重组质粒pET-28a(+)-YTHDF2在大肠杆菌BL-21菌株中进行原核表达,成功获得了大量带His标签的猪YTHDH2重组蛋白,大小约70 kD.以纯化的重组蛋白为抗原免疫新西兰大白兔制备猪YTHDF2多抗血清,ELISA结果表明制备的兔抗猪YTHDF2多抗血清效价为1∶204 800,间接免疫荧光(IFA)和Western blot试验均表明该多克隆抗体具有良好的反应性和特异性.猪YTHDF2基因序列的获得及多克隆抗体的制备为进一步研究YTHDF2在猪mRNA m6A甲基化过程中的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张宇	南京农业大学动物医学院	20	274	7.0	16.0
2	周继勇	浙江大学农业部动物病毒学重点实验室	86	753	16.0	23.0
3	顾金燕	南京农业大学动物医学院	6	25	2.0	5.0
5	黄童	南京农业大学动物医学院	1	1	1.0	1.0
6	杜柳阳	南京农业大学动物医学院	2	1	1.0	1.0