口蹄疫病毒VP2蛋白特异性单克隆工程抗体的表达与活性鉴定

• 作者: 付元芳 刘在新 包慧芳 卢曾军 孙普 张婧 曹轶梅 李冬 李坤 李平花 王省 白兴文 陈应理 马雪青
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 单个B细胞抗体技术 单克隆工程抗体 衣壳蛋白VP2
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 939-946
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0108

摘要

为了在牛上应用单个B细胞抗体技术制备口蹄疫病毒(FMDV)特异性单克隆抗体,本研究利用生物素标记O型FMDV 146S抗原,从免疫牛外周血单个核细胞(PBMCs)中分选单个抗原特异性B细胞,通过单个B细胞抗体基因测定,获得IgG抗体重链与轻链可变区编码序列,将可变区基因插入含有牛IgG抗体恒定区的pcDNA3.4载体中,构建完整IgG抗体的表达质粒.将表达质粒转染中国仓鼠卵巢悬浮细胞(CHO-S)进行抗体表达与纯化.经病毒中和试验(VNT)、间接免疫荧光试验(IFA)、酶联免疫吸附试验(ELBA)、Western-blot验证抗体的生物活性.结果 显示,获得了4株FMDV特异性单克隆工程抗体,其中2株(A35、B57)可以中和O型FMDV;2株(A7、E32)IFA检测为阳性,其中E32可特异性结合O型和A型FMDV两种抗原,但没有病毒中和活性;ELISA结果显示,E32具有较好的亲合力;Western-blot结果显示,E32可特异性结合衣壳蛋白VP2,说明在衣壳蛋白VP2存在型间保守的抗原位点,为通用型FMDV抗原检测方法的研究提供了材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘在新	中国农业科学院兰州兽医研究所	47	488	11.0	21.0
2	李坤	中国农业科学院兰州兽医研究所	19	19	3.0	4.0
3	曹轶梅	中国农业科学院兰州兽医研究所	18	65	4.0	8.0
4	卢曾军	中国农业科学院兰州兽医研究所	25	150	5.0	12.0
5	李平花	中国农业科学院兰州兽医研究所	13	5	1.0	2.0
6	白兴文	中国农业科学院兰州兽医研究所	12	0	0.0	0.0
7	孙普	中国农业科学院兰州兽医研究所	15	1	1.0	1.0
8	包慧芳	中国农业科学院兰州兽医研究所	14	52	3.0	7.0
9	张婧	中国农业科学院兰州兽医研究所	21	96	6.0	9.0
10	王省	中国农业科学院兰州兽医研究所	5	0	0.0	0.0
11	李冬	中国农业科学院兰州兽医研究所	18	42	4.0	6.0
12	陈应理	中国农业科学院兰州兽医研究所	6	7	1.0	2.0
13	付元芳	中国农业科学院兰州兽医研究所	8	0	0.0	0.0
14	马雪青	中国农业科学院兰州兽医研究所	7	9	1.0	2.0