弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒的构建与表达

• 作者: 宗永丽 李金福 汪政勇 石畅 綦廷娜
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫属 SAG1基因 GRA1基因 基因重组 重组质粒 体外表达
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 286-291
• 页数: 6页
• 分类号: R382.5
• 字数: 4687字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.1000-2707.2020.03.008

摘要

目的:构建弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒,并观察其在小鼠胚胎成纤维细胞系NIH3T3细胞中的表达.方法:采用聚合酶链反应(PCR)法分别扩增弓形虫SAG1和GRA1基因片段,导入质粒载体pcDNA3.1(+),构建真核表达重组质粒pcDNA3.1(+)-SAG1和pcDNA3.1(+)-GRA1,继而构建重组质粒pcDNA3.1(+)-SAG1-GRA1;设pcDNA3.1(+)-SAG1-GRA1为实验组、pcDNA3.1(+)为对照组分别转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光染色法鉴定其在NIH3T3细胞中的表达.结果:限制性内切酶双酶切及DNA测序分析结果显示,插入pcDNA3.1(+)的片段分别为1008 bp、570 bp和1578 bp,与预期的SAG1、GRA1和SAG1-GRA1复合基因分子大小相当、序列一致;免疫荧光染色法结果显示,转染重组质粒pcDNA3.1(+)-SAG1-GRA1的NIH3T3细胞内观察到较强的绿色荧光,而转染pcDNA3.1(+)的NIH3T3细胞内未见绿色荧光.结论:成功构建了弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒pcDNA3.1(+)-SAG1-GRA1,且该重组质粒携带的SAG1-GRA1复合基因在NIH3T3细胞中获得表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李金福	贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室	7	6	2.0	2.0
2	綦廷娜	贵州医科大学基础医学院微生物学教研室	4	2	1.0	1.0
3	石畅	中国人民解放军联勤保障部队第968医院神经内分泌科	2	0	0.0	0.0
4	汪政勇	贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室	1	0	0.0	0.0
5	宗永丽	贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室	1	0	0.0	0.0