家蚕天然Hemolin蛋白原核表达

• 作者: 刘影 杨琳 江乾森 耿明星 舒建洪
• 来源期刊: 浙江理工大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蚕 Hemolin蛋白 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 生物与生命科学
• 页码范围: 664-670
• 页数: 7页
• 分类号: Q71
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-3851(n).2020.05.011

摘要

Hemolin蛋白是一种类免疫球蛋白,属于昆虫的一种重要的先天性免疫球蛋白,家蚕(Bombyx mori)Hemolin蛋白与其他昆虫的序列具有高度的同源性,为了进一步分析家蚕Hemolin蛋白的功能,以杆状病毒感染的家蚕蚕蛹为原料,通过抗体亲和层析获得高纯度的天然Hemolin蛋白.结果 表明:重组表达菌株pET-32a-hemolin经终浓度为0.1 mmol/L IPTG低温诱导后可在大肠杆菌BL21中成功表达;通过镍离子金属螯合亲和层析并经200 mmol/L咪唑洗脱可以获得较纯的重组Hemolin蛋白;免疫新西兰大白兔产生特异性多克隆抗体通过蛋白A亲和层析柱纯化后可获得高纯度的Hemolin抗体,并经抗体亲和层析获得的天然Hemolin蛋白纯度高,可用于对Hemolin蛋白功能的进一步研究.文章提供的分离纯化高纯度家蚕天然Hemolin蛋白的方法能够推进天然免疫蛋白的纯化,为进一步研究家蚕天然Hemolin蛋白的晶体结构、蛋白质抑菌功能以及抗病毒活性奠定基础.