有机磷降解酶在重组大肠杆菌中的表达及一步纯化固定化

• 作者: 周丽亚 姜艳军 欧阳亚萍 薛赛光
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 有机磷降解酶 重组表达 组氨酸标签 一步纯化固定化 有机磷化合物
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 酶工程
• 页码范围: 2094-2105
• 页数: 12页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.200193

摘要

[背景]有机磷化合物作为一类广谱杀虫剂,因其用量大、毒性强且不易降解,在自然界中的残留已对环境造成了严重污染.[目的]有机磷降解酶(organophosphohydrolase,OpdA)可降解多种有机磷化合物,探究其被固定到NiCo2O4载体上后用于有机磷化合物的降解效果.[方法]构建含组氨酸标签(histidine tag,His-tag)的OpdA,以pET-28a(+)为载体,Escherichia coli Rosetta(DE3)为宿主细胞,在终浓度为1.0 mmol/L的IPTG诱导下表达His-tagged OpdA.采用一步纯化固定化方法,实现固定化酶(OpdA@NiCo2O4)的制备.[结果]采用水热处理和煅烧制备了含过渡金属离子的NiCo2O4,利用过渡金属离子对酶分子表面组氨酸咪唑基的配位作用,实现了发酵粗酶液中His-tagged OpdA的一步纯化固定化,在优化条件下获得了高稳定性的OpdA@NiCo2Oa;然后将其用于有机磷化合物的降解,在NaBH4存在条件下,通过级联反应和降解条件优化,实现了有机磷化合物的高效降解.[结论]该研究不但实现了重组酶的一步分离纯化和固定化,也为有机磷化合物的降解提供了一条安全、高效、环保的新途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜艳军	河北工业大学化工学院	22	100	7.0	9.0
2	周丽亚	河北工业大学化工学院	43	284	9.0	15.0
3	欧阳亚萍	河北工业大学化工学院	1	0	0.0	0.0
4	薛赛光	河北工业大学化工学院	1	0	0.0	0.0