南非2型口蹄疫病毒VP1基因的原核可溶性表达及免疫原性分析

• 作者: 丁耀忠 代军飞 刘磊 张杰 李国秀 李茜 欧云文
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒(FMDV) 南非2型(SAT2) VP1基因 可溶性表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1862-1869
• 页数: 8页
• 分类号: S855.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2020.10.014

摘要

南非2型口蹄疫(Foot-and-mouth disease serotypes Southern African territories 2,SAT2-FMD)是由南非2型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus serotypes Southern African territories 2,SAT2-FMDV)引起偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病.当前全球贸易和人员往来频繁,SAT2-FMD传入中国的风险极高,这将严重威胁我国养殖业持续健康发展.为原核可溶性表达SAT2-FMDV(GenBank No.JX014256)VP1基因,探索VP1融合蛋白的免疫原性,本研究以序列优化的pUC57-His-SUMO-SAT2-VP1重组质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增获得993 bp目的 序列,扩增产物克隆入pET32a(+)原核表达载体,构建pET32a-HisSUMO-VP1重组质粒,转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),诱导表达,亲和层析纯化.将纯化后HisSUMO-VP1融合蛋白与弗氏佐剂混匀乳化,免疫Balb/C小鼠(Mus musculus),并对免疫小鼠血清抗体、脾淋巴细胞增殖和细胞因子水平进行测定.研究结果表明,HisSUMO-VP1融合蛋白实现原核可溶性表达,大小约为63 kD,且具有较好的反应原性;免疫小鼠实验结果发现,HisSUMO-VP1融合蛋白组的小鼠免疫血清抗体水平极显著高于HisSUMO蛋白组和PBS组(P<0.001),且抗体水平呈上升趋势;HisSUMO-VP1融合蛋白组小鼠脾脏淋巴细胞发生显著地增殖反应(P<0.001),细胞因子IFN-γ和IL-2水平显著高于PBS组(P<0.05).本研究成功实现SAT2-FMDV-VP1基因的原核可溶性表达,表达的HisSUMO-VP1融合蛋白具有良好的免疫原性,为SAT2-FMDV疫苗及检测方法的研发提供数据支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘磊		49	369	11.0	17.0
2	张杰		6	32	3.0	5.0
3	李茜		7	6	2.0	2.0
4	欧云文		4	28	2.0	4.0
5	李国秀		1	0	0.0	0.0
6	丁耀忠		1	0	0.0	0.0
7	代军飞		1	0	0.0	0.0