基于适配体识别的金黄色葡萄球菌定性检测试纸条的研制及应用

• 作者: 张云红 彭云娉 卢春霞 黄巧 严慧娟 魏雪 任江涛
• 来源期刊: 食品工业科技
• 关键词: 金黄色葡萄球菌 核酸适配体 试纸条
• 年，卷（期）: 2021,（19）
• 所属期刊栏目: 分析检测|Analysis and Determination
• 页码范围: 291-297
• 页数: 7页
• 分类号: TS207.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2020120169

摘要

本研究以金黄色葡萄球菌为检测靶标,以核酸适配体为识别分子,基于双适配体夹心和侧流层析原理,构建了定性检测金黄色葡萄球菌的适配体试纸条,并对NaCl浓度、适配体浓度、纳米金-适配体包被量及捕获探针包被量等实验条件进行优化,获得适配体试纸条最佳制备条件.在优化条件下对试纸条的灵敏度、特异性进行分析测试,最后将试纸条对116份食品进行金黄色葡萄球菌检测,并与国标法(GB 4789.10-2016)对比验证.结果显示,适配体试纸条最佳制备条件为NaCl浓度为80 mmol/L、适配体偶联浓度为1μmol/L、结合垫上纳米金-适配体的稀释体积比为1:2、捕获探针浓度为25μmol/L.在最佳条件下,适配体试纸条对金黄色葡萄球菌的可视化检测限为2×103 CFU/mL,检测时间为5 min,且与其他食源性致病菌如鼠伤寒沙门氏菌、单增李斯特菌、大肠杆菌、阪崎肠杆菌、痢疾志贺氏菌等无交叉反应,具有较高的特异性.将本方法应用于食品中金黄色葡萄球菌的定性检测,检测结果与国标法完全一致.该方法简便快速、准确可靠、成本低,适用于食品样品中金黄色葡萄球菌的定性检测.