GST融合的人血浆蛋白S成熟肽的原核表达

• 作者: 兰风华 卢爱薇 朱忠勇 程烽 谢飞 郑德柱
• 来源期刊: 福州总医院学报
• 学科: 医学
• 关键词: GST 蛋白S 人血浆 成熟肽 诱导 融合表达载体 PS E.coli 亲和层析柱 原核表达
• 年，卷（期）: fzzyyxb_2004,（1）
• 页码范围: 18-20
• 页数: 3页
• 分类号: R392

摘要

目的：构建人蛋白S(protein S，PS)的原核表达载体并诱导其表达。方法：自行设计引物，通过PCR技术，以人PS真核表达载体为模板扩增PS成熟肽编码序列，PCR产物经EcoR1／BamHI双酶切后，将其克隆至GST融合表达载体pGEX—2T中，在E．coli BL21中诱导GST—PS融合蛋白的表达。结果：聚丙烯酰胺凝胶电泳(10％SDS—PAEG)显示。在IPTG的诱导下，BL21重组菌高效表达出一个分子量约为96kD产物，与预期大小相符，该产物可通过GST亲和层析柱纯化。对重组质粒的序列分析表明，插入片段的序列与Genebank登录的人PS基因编码序列完全一致。结论：人PS编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-2T，并在E．coli BL21中获得表达，为进一步研究奠定了基础。