O型口蹄疫病毒VP1基因的克隆及其在重组杆状病毒中的表达

• 作者: 尹革芬 葛淑敏 郑敏 金宁一 金扩世 韩松 鲁会军
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 VP1基因 杆状病毒 表达
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 42-44
• 页数: 3页
• 分类号: Q78|S852.65
• 字数: 2700字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4545.2006.01.013

摘要

利用杆状病毒表达系统进行了口蹄疫病毒VP1基因在Sf9细胞中的表达研究.首先克隆了VP1基因片段,将pMD18-VP1质粒及杆状病毒转座载体质粒pFastBac Ⅰ分别用BamH I及HindⅢ酶切后,用T4 DNA连接酶连接,构建了重组质粒pFastBac-VP1;再将该重组质粒转化DH10Bac感受态细菌,在菌体内进行重组,并经三重抗性与蓝白斑筛选,得到杆状病毒重组质粒Bacmid-VP1;将Bacmid-VP1转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒,并进行表达水平的检测.经SDS-PAGE和Western-blotting检测,结果表明,VP1蛋白在重组杆状病毒中获得表达.