sTNFR Ⅱ和VIP融合蛋白的基因克隆表达、纯化及活性检测

• 作者: 刘丹 曾位森 李玲 杨艳妮 王珊珊 王虹 陈百宏 陈金华
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: sTNFRⅡ VIP 融合蛋白 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 69-73
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3909字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2006.05.014

摘要

可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ(sTNFRⅡ)和血管活性肠肽(VIP)对类风湿性关节炎(RA)均有治疗作用,但两者的作用机制不同.制备两者融合蛋白,可能具有更好的防治类风湿关节炎的作用.用含有VIP基因序列的上游引物和sTNFRⅡ的下游引物,用PCR扩增出由连接序列将VIP和sTNFRⅡ基因连接的片段,再亚克隆到原核表达载体pET32a,在大肠杆菌DH5α内诱导表达.表达的产物经离子交换、疏水层析纯化,并用体外中和试验检测其抑制TNF细胞毒及肝细胞膜特异性脂蛋白(Lsp)诱导的细胞毒生物活性.结果显示构建的pET32a-VIP-sTNFRⅡ表达载体在大肠杆菌DH5α内以包涵体形式表达,疏水层析结合离子交换层析纯化后,融合蛋白具有较好的抑制炎症分子诱导的炎症反应生物活性,为将来应用打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王虹		3	13	2.0	3.0
2	陈金华		2	6	1.0	2.0
3	曾位森		2	6	1.0	2.0
4	刘丹		2	6	1.0	2.0
5	杨艳妮		2	6	1.0	2.0
6	王珊珊		1	0	0.0	0.0
7	陈百宏		1	0	0.0	0.0
8	李玲		1	0	0.0	0.0