抗口蹄疫病毒phage-scFv及可溶性scFv的构建

• 作者: 曹盛丰 王国丰
• 来源期刊: 华东理工大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 噬菌体-scFv 可溶性scFv 噬菌体展示技术
• 年，卷（期）: 2006,（8）
• 页码范围: 933-938
• 页数: 6页
• 分类号: Q785|S852.3
• 字数: 4689字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-3080.2006.08.009

摘要

利用重组DNA技术在抗口蹄疫病毒单克隆抗体1C7 VH基因和VL基因之间导入一段连接肽[(Gly4Ser)3],采用重叠延伸拼接法,经聚合酶链反应(PCR)扩增获得scFv基因.将scFv基因克隆至噬菌粒pCANTAB 5E载体,转化E.coli TG1,构建噬菌体抗体文库.用M13KO7辅助噬菌体挽救及固相口蹄疫病毒(FMDV)抗原对噬菌体抗体文库的三轮"吸附-洗脱-扩增"的淘洗,筛选出scFv阳性克隆.将阳性克隆转化E.coli BH2151,通过异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导可溶性scFv蛋白的表达.酶联免疫吸附实验(ELISA)检测表明:scFv克隆表达的phage-scFv及可溶性scFv与FMDV亲和力高,特异性强.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹盛丰	上海商学院艺术设计学院	9	11	2.0	2.0
5	王国丰	上海交通大学农业与生物学院	6	12	2.0	3.0