黄绿木霉纤维素酶提纯及其性质研究

• 作者: 宋金柱 张晶 杨谦 陈中祥
• 来源期刊: 哈尔滨工业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 木霉T2 纤维素酶 提纯 性质
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 页码范围: 1923-1926
• 页数: 4页
• 分类号: Q539.3
• 字数: 3016字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0367-6234.2006.11.027

摘要

通过(NH4)2SO4分级沉淀、Sephadex G-100分子筛层析和DEAE Sephadex A-50离子交换层析等步骤,分离纯化出木霉T2纤维素酶系中达到电泳纯的3种内切葡聚糖酶(EGⅠ、EGⅡ、EGⅢ)和2种β-葡萄糖苷酶(BGⅠ、BGⅡ).通过SDS-PAGE和IEF电泳测得5个酶组分的相对分子质量分别为62.3 ku、71.9 ku、52.6 ku、85.3 ku和78.3 ku,等电点分别为5.4、4.8、5.0、5.6和5.8.此酶系均为糖蛋白,含糖量分别为17.7%、11.7%、15.6%、17.8%、19.3%.5个酶组分均属酸性纤维素酶,最适pH都是5.0;3种内切葡聚糖酶的最适温度皆为60 ℃,2种β-葡萄糖苷酶的最适温度都是55 ℃.Mn2+、Fe2+、Zn2+对5种纤维素酶都有一定的激活作用,尤其是Mn2+对内切葡聚糖酶的激活作用极为显著;Mg2+、Cu2+、脲对5种纤维素酶都具有不同程度的抑制作用.酶学动力学分析表明5种纤维素酶组分的Km值分别为0.093、0.083 8、0.079 0、0.085 1和0.077 8 mg/mL,Kcat值为101.7、119.6、11.4、111.4和162.1 s-1.内切葡聚糖酶对底物CMC-Na亲和力的大小与酶的催化效率之间并无相关性,BG对底物水杨苷亲和力的大小与酶的催化效率之间有一定的相关性.β-葡萄糖苷酶有较高的底物专一性,只对水杨苷有活力;内切葡聚糖酶在对羧甲基纤维素钠有活力的同时,对滤纸和秸秆粉也有微弱的活力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨谦	哈尔滨工业大学生命科学与工程系	191	3458	29.0	49.0
2	宋金柱	哈尔滨工业大学生命科学与工程系	28	602	14.0	24.0
3	张晶	哈尔滨工业大学生命科学与工程系	33	219	8.0	14.0
4	陈中祥	哈尔滨工业大学生命科学与工程系	4	35	3.0	4.0