口蹄疫病毒VP1基因在胡萝卜中的表达

• 作者: 张娅 曾君祉 陈耀锋 黄华樑
• 来源期刊: 西北农林科技大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 转基因胡萝卜 口服疫苗 口蹄疫病毒VP1基因
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 农业科学
• 页码范围: 75-80
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 5406字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-9387.2007.03.017

摘要

为了生产一种可以直接口服的口蹄疫疫苗,以胡萝卜(Daucus carota L.var.sativa)无菌幼苗下胚轴诱导的愈伤组织为受体材料,通过农杆菌LBA4404介导的遗传转化,在CaMV双35S启动子的驱动下,将口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)结构蛋白VP1基因的活性肽片段(包括2个141～160位肽和1个200～213位肽的基因片段)导入胡萝卜愈伤组织细胞.经PCR和PCR-Southern杂交等方法鉴定转化苗,确认口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因已整合到胡萝卜染色体中,转化效率达到52%.SDS-PAGE试验结果初步证明,在转化苗总蛋白中有目的基因表达,胡萝卜种子中可溶性蛋白含量最高,达3.57 g/L,而根中可溶性蛋白含量最低,仅有0.17 g/L;靠近心叶的叶片可溶性蛋白含量可达到1.475 g/L,而最外部叶片可溶性蛋白含量仅有0.37 g/L,相差近5倍.Dot-ELISA和ELISA检测结果表明,转化苗中表达的口蹄疫病毒结构蛋白VP1可以与FMDV灭活疫苗免疫动物制备的抗体特异结合.以上试验结果证明,口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因在转基因胡萝卜中表达成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈耀锋	西北农林科技大学农学院	87	778	17.0	22.0
2	黄华樑	中国科学院遗传与发育学研究所	27	121	7.0	9.0
4	曾君祉	中国科学院遗传与发育学研究所	5	24	3.0	4.0
5	张娅	西北农林科技大学农学院	3	12	2.0	3.0