抗癫痫肽/GST融合表达载体的构建及蛋白表达

• 作者: 张德安 李晶华 王宗仁 邵中军 马静 高碧峰
• 来源期刊: 中国生化药物杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 抗癫痫肽 GST 载体 融合蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 148-151
• 页数: 4页
• 分类号: Q51
• 字数: 2694字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1678.2007.03.002

摘要

目的 构建抗癫痫肽(anti-epilepsy peptide,AEP)/GST融合表达载体,原核表达GST-AEP融合蛋白.方法 从克隆载体质粒pGEM-T/AEP中双酶切,得到AEP片段;通过中间载体puc18,转换酶位点;最后将AEP基因克隆入表达载体pGEX-4T-1质粒中,构建融合表达载体pGEX-4T-1/AEP;转化感受态大肠杆菌DH5α,经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得GST-AEP融合蛋白;SDS-PAGE分析表达产物,确定蛋白质高表达条件;超声裂解法鉴定蛋白质可容性;凝胶薄层扫描确定蛋白质相对表达量.结果 经酶切鉴定、测序证明,AEP基因已正确插入到pGEX-4T-1中,经IPTG诱导后,表达出相对分子质量约为36 000的融合蛋白,该融合蛋白以包涵体形式存在,约占总蛋白质的70%左右.结论 pGEX-4T-1/AEP载体构建成功,融合蛋白在大肠杆菌中获得高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宗仁	第四军医大学附属西京医院中医科	117	1103	19.0	25.0
2	马静	第四军医大学附属西京医院中医科	101	591	13.0	18.0
3	高碧峰	第四军医大学附属西京医院中医科	6	15	3.0	3.0
4	李晶华	第四军医大学附属西京医院中医科	33	176	8.0	12.0
5	邵中军	第四军医大学流行病学教研室	48	216	8.0	13.0
7	张德安	第四军医大学附属西京医院中医科	5	10	2.0	3.0